Acta Univ. Agric. Silvic. Mendelianae Brun. 2008, 56(2), 281-284 | DOI: 10.11118/actaun200856020281

Použití metod molekulární genetiky pro identifikaci dřevních hub v dřevěných konstrukcích

Elena Bobeková1, Michal Tomšovský2, Petr Horáček3
1 Gagarinova 648/23, 96 223 Očová, Slovenská republika
2 Ústav ochrany lesů a myslivosti, Mendelova zemědělská a lesnická univerzita v Brně, Zemědělská 3, 613 00 Brno, Česká republika
3 Ústav nauky o dřevě, Mendelova zemědělská a lesnická univerzita v Brně, Zemědělská 3, 613 00 Brno, Česká republika

Cílem tohoto článku je zhodnotit možné použití molekulárně biologických metod pro detekci dřevních hub přímo z rozloženého dřeva při použití komerčního kitu pro izolaci DNA vyvinutého pro půdní substrát. Experiment založený na identifikaci dřevomorky domácí (Serpula lacrymans) z naočkovaných dřevěných špalíčků v laboratorních podmínkách byl následován terénní detekcí dřevních hub přímo ze dřevěných konstrukcí. Houbová DNA byla identifikována při použití metod založených na polymerázové řetězové reakci (PCR) zahrnující druhově specifickou PCR a sekvenaci namnožené ITS oblasti ribozomální DNA.
Výsledky ukázaly, že použitý kit (PowerSoil™ DNA extraction kit), vyvinutý výrobcem na izolaci z půdy, je poměrně vhodný na izolaci DNA i ze dřeva - v případě laboratorního experimentu se podařilo detekovat dřevomorku se 100 % úspěšností. Na druhou stranu, v případě starších vzorků zetlelého dřeva bez viditelného mycelia (dům v Banské Štiavnici) byla úspěšnost detekce nižší. U jiných vzorků z terénu (zámek v Náměšti nad Oslavou, lanové centrum Brno-Lesná) byla pomocí sekvenace ITS oblasti detekována přítomnost druhů dřevních hub Donkioporia expansa a Amylostereum areolatum, zatímco v případě domu v Očové se podařilo odhalit pouze přítomnost plísně Cladosporium oxysporium.

dřevo, houby, Serpula lacrymans, Donkioporia expansa, Amylostereum areolatum, Cladosporium oxysporium, DNA, PCR

Application of molecular genetic methods for identification of wood-decaying fungi in wood constructions

The aim of the paper is to evaluate the utilization of molecular biology methods for detection of wood decaying fungi directly from decomposed wood using a commercial DNA extraction kit developed for soil substrates (PowerSoil™ DNA isolation kit). The experiment based on dry rot fungus (Serpula lacrymans) detection from inoculated wooden pieces under laboratory conditions was followed by field detection of wood-decaying fungi from wood structures on building constructions. Fungal DNA was identified using the PCR-based methods including species-specific PCR and sequencing of amplified ITS region of ribosomal DNA.

Keywords: wood, fungi, Serpula lacrymans, Donkioporia expansa, Amylostereum areolatum, Cladosporium oxysporium, DNA, PCR
Grants and funding:

We thank MSM 6215648902 and the Grant Agency of the Czech Republic, project No. 526/03/HO36.

Received: November 5, 2007; Published: November 14, 2014  Show citation

ACS AIP APA ASA Harvard Chicago IEEE ISO690 MLA NLM Turabian Vancouver
Bobeková, E., Tomšovský, M., & Horáček, P. (2008). Application of molecular genetic methods for identification of wood-decaying fungi in wood constructions. Acta Universitatis Agriculturae et Silviculturae Mendelianae Brunensis56(2), 281-284. doi: 10.11118/actaun200856020281
Download citation

References

  1. BODLES, W. J. A., FOSSDAL, C. G., WOODWARD, S., 2006: Multiplex real-time PCR detection of pathogen colonization in the bark and wood of Picea sitchensis clones differing in resistance to Heterobasidion annosum. Tree Physiology 26, 775-782 DOI: 10.1093/treephys/26.6.775 Go to original source...
  2. GARDES, M., BRUNS, T. D., 1993: ITS primers with enhanced specificity for basidiomycetes-application to the identification of mycorhizae and rusts. Molecular Ecology 2 (2), 113-118 DOI: 10.1111/j.1365-294X.1993.tb00005.x Go to original source...
  3. GREEN, M. J., THOMPSON, D. A., MACKENZIE, D. J., 1999 : Easy and efficient DNA extraction from woody plants for the detection of Phytoplasmas by Polymerase Chain Reaction. Plant Disease 83, 482-485 DOI: 10.1094/PDIS.1999.83.5.482 Go to original source...
  4. HÖGBERG, N., LAND, C. J., 2004: Identification of Serpula lacrymans and other decay fungi in construction timber by sequencing of ribosomal DNA - A practical approach. Holzforschung 58, 199-204 DOI: 10.1515/HF.2004.030 Go to original source...
  5. JASALAVICH, C.A., OSTROFSKY, A., JELLISON, J., 2000: Detection and identification of decay fungi in spruce wood by restriction fragment length polymorphism analysis of amplified genes encoding rRNA. Applied and Environmental Microbiology 66, 4725-4734 DOI: 10.1128/AEM.66.11.4725-4734.2000 Go to original source...
  6. MORETH, U., SCHMIDT, O., 2000: Identification of indoor rot fungi by taxon-specific priming polymerase chain reaction. Holzforschung 54 (1), 1-8 DOI: 10.1515/HF.2000.001 Go to original source...
  7. SCHMIDT, O., MORETH, U., 2000: Species-specific PCR primers in the rDNA-ITS region as a diagnostic tool for Serpula lacrymans. Mycological research. 104 (1), 69-72 DOI: 10.1017/S0953756299001562 Go to original source...
  8. WEISS, B., WAGENFÜHR, A., KRUSE, K., 2000: Beschreibung und Bestimmung von Bauholzpilzen, DRW-Verlag
  9. WHITE, T. J., BRUNS, T. D., LEE, S. B., TAYLOR, J. W., 1990: Amplification and direct sequencing of fungal ribosomal RNA genes for phylogenetics. - In: INNIS, M. A., GELFAND, D. H., SNINSKY, J. J., WHITE, T. J.: PCR Protocols, A guide to Methods and Applications: 315-322. Academic Press, New York Go to original source...

This is an open access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License (CC BY NC ND 4.0), which permits non-comercial use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original publication is properly cited. No use, distribution or reproduction is permitted which does not comply with these terms.